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层流手术室的空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。不同级别的层流手术室其空气洁净度标准不同，例如美国联邦标准1000级为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤1000颗或每升空气中≤35颗。10000级层流手术室的标准为每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数≤10000颗或每升空气中≤350颗。依次类推。

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还对室内的清洁工作有特殊的要求，室内墙角全部为弧形结构设计，找不到任何一个90°的墙角，使细菌无处藏身，避免了清除不尽的死角，并且室内无须使用物理或化学方法进行消毒，这样既节省劳动又防止外来污染的进入。

层流手术室不仅要求高度洁净的空气（进入手术室的空气首先须经过滤器净化），而且要求能控制气流的流通方向（即采用层流超净装置），手术室内形成正压环境，使气流从洁净度高的手术区域流向洁净度低的区域，一股细小、薄层的气流，以均匀的流速向同一方向输送，并带走和排出气流中的尘埃颗粒（尘粒）和细菌。

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一个完整的手术室包括以下几部分：①卫生通过用房：包括换鞋处、更衣室、淋浴间、风淋室等；②手术用房：包括普通手术间、无菌手术间、层流净化手术间等；③手术辅助用房：包括洗手间、间、复苏间、清创间、石膏间等；④消毒供应用房：包括消毒间、供应间、器械间、敷料间等；⑤实验诊断用房：包括内窥镜、病理、超声等检查室；⑥教学用房：包括手术观察台、闭路电视示教室等；